本品含有DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，適用于各種常見和腫瘤動(dòng)物細(xì)胞株，凍存的細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存，無需經(jīng)過程序性降溫過程。本品的配方成分明確，不含有動(dòng)物來源的蛋白，不含血清，可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全，且適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。

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biosharp BL203B 無血清細(xì)胞凍存液

使用方法：

細(xì)胞凍存步驟

1、 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于試管中。

2、 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細(xì)胞數(shù)。

3、 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rmp離心5分鐘，收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

4、 加入適量的本凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為5*105-1*107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。

5、 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管1ml或1.5ml。

6、 直接將分裝好的細(xì)胞凍存管置于-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期保存。

7、 若需液氮長(zhǎng)期保存，需先置于-80℃至少一天后方可轉(zhuǎn)至液氮罐中。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

1、 從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即置于37℃水浴槽中快速解凍。

2、 待凍存管中的細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中與細(xì)胞混合，將其中的混合液移至含有約5ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中，1000rmp離心5分鐘，收集凍存細(xì)胞沉淀，移去上清液（注意勿將細(xì)胞沉淀倒掉）。

3、 加入適量的新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入細(xì)胞沉淀中，輕柔混勻，將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。

4、 鏡檢觀察，待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進(jìn)行其他研究或者培養(yǎng)處理。

注意事項(xiàng)：

1、 本品可用于常規(guī)細(xì)胞的凍存，-80℃可長(zhǎng)期保存，細(xì)胞的存活率在90-98%。

2、 使用本產(chǎn)品加入細(xì)胞后，應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間，并盡快移至-80℃保存。

3、 對(duì)于干細(xì)胞（ES細(xì)胞）、原代等細(xì)胞凍存時(shí)，建議使用前，先對(duì)所要凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少1周以上的試驗(yàn)性凍存培養(yǎng)，確認(rèn)效果后再正式大批量?jī)龃妗?/span>

4、 本品含有10%DMSO，部分對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞，建議也許先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)效果后再大量正式使用。

5、 對(duì)于沒有保種的新的細(xì)胞類型，使用本品時(shí)建議凍存部分細(xì)胞于含血清的凍存液中，以避免可能的意外情況。

6、 取用凍存液均要在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作 。

7、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件：常溫運(yùn)輸，短期4℃保存，有效期一年；長(zhǎng)期-20℃保存，有效期兩年。

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