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百泰克 SYBR Green I(電泳染色用)

杭州銘特生物科技有限公司
會員指數(shù): 企業(yè)認證:

價格:電議

所在地:浙江 杭州市

型號:

更新時間:2021-11-08

瀏覽次數(shù):1049

公司地址:杭州市西湖區(qū)吉鴻時代商廈

吳沛(先生)  

產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品特點:無毒,高靈敏的花菁核酸染料,紫外凝膠透射儀觀測靈敏度于EB相當,用百泰克Ultrapower?可見光凝膠透射儀比紫外光條件下的靈敏度比EB染色法高8-20倍。

公司簡介

杭州銘特生物科技有限公司成立于2019年,是一家專注于實驗室耗材、試劑銷售與代理的公司,優(yōu)勢代理品牌有NEST、甄選、康寧、PeproTech、浙江中在、CST、麥克林、阿拉丁、Biosharp、MerckMillipore、Pall、Abcam、ABI、Thermo、Jackson、BD、NEB、Qiagen、Axygen、碧云天等;
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產(chǎn)品說明

產(chǎn)品編號:EP1601-1 參考價格:100ul 440元
                 EP1601-2 參考價格:500ul 1835元

無毒,高靈敏的花菁核酸染料,紫外凝膠透射儀觀測靈敏度于EB相當,用百泰克Ultrapower®可見光凝膠透射儀比紫外光條件下的靈敏度比EB染色法高8-20倍。

SYBR Green I核酸染料(電泳用)
        SYBR Green I是高靈敏的DNA熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡單:無須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 與dsDNA 結(jié)合熒光信號會增強800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝膠樣品熒光信號強,背景信號低??蛇m用于多種電泳分析。
SYBR Green I 適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場凝膠電泳,和毛細管電泳等。
SYBR Green I 與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對分子生物學中常用的酶(如:Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。另外,SYBR Green I 與EB相比,誘變能力大大降低。
 
 
SYBR Green I 核酸染料特點
◆  高靈敏:至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
◆  信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
◆  操作簡單:無須脫色或沖洗。
◆  適用范圍廣:可適用于多種電泳分析。
◆  使用方便:不影響其它修飾酶作用。
◆  經(jīng)濟:價格比銀染便宜。
 
 
電泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I預染方法
◆   該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳
◆   工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍,即為SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一個月以上。
◆   制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。
◆   樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10。
◆   DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀釋液和1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合。
◆   上樣、電泳:按常規(guī)操作。

SYBR Green I后染方法
◆   按照常規(guī)方法進行電泳。
◆   用PH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液,混勻,制成染色溶液。
◆   將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
◆   用藍盾TM觀測。藍光可透過玻璃,觀測聚丙烯酰胺凝膠時,可直接將托有凝膠的玻璃平皿放入藍盾TM內(nèi)觀測。
 
SYBR Green I使用注意事項
◆  在”SYBR GreenⅠ預染色方法”中,電泳時間不要超過2小時,否則SYBR GreenⅠ會從DNA上分離出來,會產(chǎn)生彌散狀條帶。
◆  在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中,SYBR Green I可以全部從雙鏈核酸上去掉。
◆  如果想對用 SYBR Green I 染過的膠進行 Southern blots,建議在預雜化和雜化溶液中加入0.1%- 0.3% 的SDS。
◆ 在紫外照射透視下,與雙鏈 DNA 接合的 SYBR Green I 呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。
◆  SYBR Green 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
 
SYBR Green I熒光定量PCR
      SYBR Green I與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強800-1000倍。在PCR反應體系中,加入過量SYBR Green I熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,熒光信號增強,而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。


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