細(xì)胞凍存液配方
發(fā)布時(shí)間：2019-05-21瀏覽次數(shù)：1116返回列表
細(xì)胞凍存前應(yīng)該做哪些準(zhǔn)備呢？
1.準(zhǔn)備適量凍存管，做好標(biāo)記后置于4℃冰箱預(yù)冷；
2.配制凍存液：
一般為80%完全培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO， 需要現(xiàn)配現(xiàn)用
3.程序降溫
a.按照細(xì)胞傳代步驟1-7操作制備細(xì)胞懸液并離心；
b.棄去上清，加入適當(dāng)體積的凍存液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液；
c.將1 ml細(xì)胞懸液加入加入之前已做好標(biāo)記的凍存管中并做好記錄；
d.將凍存管放入梯度凍存盒然后保存至-80℃過夜（可以先在4℃冰箱放置30 min，然后轉(zhuǎn)移至-20℃放置1-2 h，zui后轉(zhuǎn)移至-80℃過夜），第二天取出放入液氮罐，并記錄好位置信息。
是不是很繁瑣？我們來看一下HAKATA無血清細(xì)胞凍存液：
直接從4°C冰箱中取出使用，凍存管放于-80°C過夜，再轉(zhuǎn)移至液氮中。
就是這么簡單直接，那么它的效果怎么樣呢？
我們來看一組對比
普通凍存液與HAKATA無血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞復(fù)蘇情況
可見，使用HAKATA無血清細(xì)胞凍存液的細(xì)胞復(fù)蘇（存活率和活力）更好
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普通凍存液 |
HAKATA無血清細(xì)胞凍存液 |
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配置 |
需要現(xiàn)配，配方麻煩 |
取出即用 |
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凍存方式 |
程序降溫，繁瑣耗時(shí) |
無需程序降溫，直凍-80°C |
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適用性 |
一般培養(yǎng)細(xì)胞 |
適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞 |
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安全性 |
無法把控 |
配方明確，不含動物來源性蛋白 |
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存活率 |
凍存后復(fù)蘇率低 |
細(xì)胞（存活率和活力）高達(dá)90%-98%，批次差異小 |
HAKATA無血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80°C長期保存（>5年）。Cell Freezing Medium配方明確，不含動物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
