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麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 更新日期:2020-07-29 16:28
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。

實(shí)驗(yàn)原理:
WGA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。已知WGA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將WGA和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,B和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中WGA的濃度呈比例關(guān)系。



實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1、試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2、加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免第1孔與zui后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性;一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過(guò)多,可使用多道移液器。
3、孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4、洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5、反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6、建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7、建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商聯(lián)-系,如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線(xiàn)圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍;
 
 
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