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進口檢測Elisa試劑盒原理與特點優(yōu)勢

發(fā)布時間:2021-01-06瀏覽次數(shù):1238返回列表

進口檢測Elisa試劑盒原理:

進口檢測Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠還原型谷胱甘肽(GSH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠還原型谷胱甘肽(GSH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


進口檢測Elisa試劑盒樣本處理及要求:


1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。


4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。


注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

進口檢測Elisa試劑盒優(yōu)勢特點:

(1)、原裝進口試劑——性、靈敏性、特異性。

(2)、規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。

(3)、優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強。

(4)、適用范圍——適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。

(5)、可檢測指標齊全——生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。

(6)、節(jié)省實驗經(jīng)費。


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