古朵闡述—如何降低elisa試劑盒實驗的誤差概率?

  做實驗出現(xiàn)誤差在所難免，不過我們做好了相關事項的話還是可以降低這種概率的。那如何降低elisa試劑盒實驗的誤差概率呢?

  一、檢驗技師。應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。

  二、使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

  三、仔細閱讀說明書。嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。ELISA試劑盒不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。

  四、洗滌干凈。洗板不干凈，酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性。

  五、嚴控反應時間。反應時間過長，酶失活;反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

  六、注意ELISA試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。

  七、評估試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。

  八、嚴格掌握顯色時間。顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果。

  九、加樣要準確、快速。如果加樣不準確，酶生成物的量不能確定，ELISA試劑盒直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關，所以加樣應慎重。

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