脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研試驗(yàn)，我公司的脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺
英文名稱：Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas
產(chǎn)品貨號(hào)：SY0270
產(chǎn)品規(guī)格：15KU|10×15KU

脫氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一種發(fā)現(xiàn)于多種細(xì)胞和組織的核酸酶，屬核酸內(nèi)切酶，靶向切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生5’端為磷酸基團(tuán)、3’端為羥基的多聚核苷酸，平均消化產(chǎn)物zuì小為多聚四核苷酸。DNase可催化多種形式DNA，如單鏈DNA、雙鏈DNA，甚至染色質(zhì)（其切割速率受組蛋白影響）。zuì佳的工作范圍是pH7-8，DNase的活性依賴于Ca2+，并可被二價(jià)金屬離子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護(hù)酶使其不被水解。在Mg2+存在下，該酶可隨機(jī)識(shí)別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點(diǎn)；而在Mn2+存在的條件下，可同時(shí)識(shí)別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割。DNase Izuì早從牛胰腺中分離而來，至今哺乳動(dòng)物胰腺也是該酶的zuì主要的來源之一。

本品來自牛胰腺，由四種色譜區(qū)分的組分A，B，C，D構(gòu)成，摩爾比為4:1:1，而D組分非常少。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用于清除蛋白或RNA樣品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使標(biāo)記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應(yīng)，酶活力≥2000Kunit Units/mg蛋白。

中文別名：脫氧核糖核酸I；5′-寡核苷酸-水解酶；
英文別名：DNase I; Deoxyribonucleate; 5’-Oligonucleotidohydrolase;
CAS：9003-98-9
分子量：~31kDa
孔尼茨單位：≥2000Kunit Units/mg protein
類型：Type IV
zuì佳PH：7～8
外觀：白色至淺褐色凍干粉
純度：Protein: ≥80% by Biuret
溶解性：0.15M NaCl：5mg/ml，無色透明溶液
激活劑：多種二價(jià)金屬離子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+
抑制劑：β-巰基乙醇；螯合劑；SDS；肌動(dòng)蛋白
活力單位定義：25℃，pH5.0條件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個(gè)酶活力單位（Kunitz unit）。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期3年。

根據(jù)您的關(guān)注的脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺(9003-98-9)(Protein:≥80%)，脫氧核糖核酸I，5′-寡核苷酸-水解酶，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：



名稱：非凍型血液RNA保存液
貨號(hào)：BTN111202
規(guī)格：100mL
由于血液富含RNase，因此血液RNA非常容易降解，是臨床分子生物學(xué)研究中的一個(gè)棘手的問題。為解決此問題，本公司在非凍型組織RNA保存液的基礎(chǔ)上，開發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 能快速滲透到新鮮血液細(xì)胞內(nèi)，抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天，4℃可放置5天，-20℃可放置3個(gè)月。
2. 操作簡(jiǎn)單，直接將本產(chǎn)品和新鮮血液細(xì)胞沉淀按比例混合即可。
3.適用于人新鮮血和哺乳動(dòng)物新鮮血液，不適用于陳舊血液和凍凝血液，也不適用于禽類血液和其他動(dòng)物血液。
4. 重復(fù)性好，效果跟進(jìn)口同類產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNA提取試劑盒提取RNA。

儲(chǔ)存條件：室溫運(yùn)輸及保存，有效期兩年。

使用方法：
注意：RNase污染無處不在，zuì好用本公司的固相RNase清除劑處理RNA工作區(qū)域，千萬不要使用烷基化試劑DEPC(相當(dāng)于芥子氣)。

一:以白細(xì)胞為材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室溫1500-2000 g離心新鮮抗凝血液10-15分鐘，zuì上層為血漿，zuì下層為紅細(xì)胞，中間層為膜狀的、含白細(xì)胞的Buffy Coat(含白細(xì)胞多的血液此層可能很厚)。
2. 吸出血漿后，小心將中間的白細(xì)胞層吸出(允許污染部分紅細(xì)胞)到新的離心管中，加入5-10倍體積的本產(chǎn)品，混勻后放常溫(不超過30℃)保存不超過3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會(huì)刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)去掉上清時(shí)會(huì)丟失)。

二：以EDTA抗凝全血為材料的保存方法
3. 將血液取到EDTA抗凝管中后，迅速將0.5mL血液與1.5mL本產(chǎn)品混合，充分顛倒混勻，然后放常溫(不超過30℃)保存不超過3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會(huì)刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)去掉上清時(shí)會(huì)丟失)。

三：血液RNA的提取(本產(chǎn)品不含RNA提取試劑。此處以本公司的跟Trizol相當(dāng)?shù)膭?dòng)物RNA提取試劑盒操作步驟為參考。用戶也可以使用其他RNA純化試劑)
4. 提取RNA時(shí)，如果保存的白細(xì)胞在-20℃，則需要先室溫化凍，如果保存在常溫或4℃，則直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL離心管中，5000g室溫離心1分鐘。
6.小心吸棄上清液(本產(chǎn)品)，細(xì)胞將形成沉淀(如果樣品時(shí)全血，沉淀中將含有大量血液蛋白)。注意：上清一般會(huì)很渾濁，一定要盡可能棄盡。有時(shí)沉淀上面有白色晶體出現(xiàn)，屬于正?，F(xiàn)象。
7.在細(xì)胞沉淀中加入動(dòng)物RNA提取試劑盒 1mL溶液A，劇烈震蕩30秒(不能感覺到震蕩即可，一定要看見管底液體旋轉(zhuǎn)起來，否則只是液體表面的震動(dòng)，下同)。震蕩后顛倒幾次看溶液是否均勻，如果有顆粒狀物體說明還需要震蕩裂解。
8.室溫放置5分鐘以使細(xì)胞充分裂解。
9. 將0.2mL自備的氯fǎng加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
10. 12000～15000g4℃離心3分鐘。一般上清為無色的水相(含RNA，約0.5-0.9mL)；中間層為白色，含有DNA、蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物，不要觸及；下層為有機(jī)相，一般呈深紅色。注意：有時(shí)水相比重大于有機(jī)相，出現(xiàn)反相現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)該取下面的水相。
11.小心將水相轉(zhuǎn)移到另一自備的1.5mL塑料離心管中。如果水相超過0.75mL，則需要分成2管，否則在下步?jīng)]法加入等體積的異丙醇。
12. 加入等體積的異丙醇到水相中，充分顛倒混勻。
13. 12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA。
14. 吸棄上清。注意：如果離心后出現(xiàn)兩個(gè)相，則需要吸棄上面的一相，然后在下相(含RNA)中加入一倍體積的超純水和一倍體積的異丙醇，混勻后12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA，吸棄上清。
15. 將75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中，震蕩幾秒后12000～15000g4℃離心1分鐘。
16. 棄上清
17. 12000～15000g4℃離心半分鐘，用移液槍去除殘留的液體。
18. 將20-50μL DEPC處理的水加入到沉淀中并吹打溶解，立即用于下述完整性、產(chǎn)率和純度的檢測(cè)，也可直接用于后續(xù)RT-PCR等試驗(yàn)或存放于-80℃待用。

四: RNA的檢測(cè)(列出步驟僅供參考，本產(chǎn)品不提供相關(guān)產(chǎn)品)
19. RNA完整性的電泳檢測(cè)：強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳，因?yàn)榉亲冃阅z中單鏈RNA分子會(huì)自生折疊成各種形狀，尤其不能使用DNA上樣液，因?yàn)闆]有經(jīng)過去RNase處理。
20. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定：將5-10μl RNA用TE緩沖液(pH8.2)稀釋10倍后檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。人血RNA產(chǎn)率一般為2-5μg/mL。
21. RNA純度測(cè)定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。


關(guān)注脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺(9003-98-9)(Protein:≥80%)，脫氧核糖核酸I，5′-寡核苷酸-水解酶的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


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