ALH022 微量樣品RNA提取試劑盒

產品簡介
微量樣品RNA提取試劑盒由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,微量樣品RNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質RNA提取純化之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括微量樣品RNA提取試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:微量樣品RNA提取試劑盒
英文名稱:Total RNA Extraction Kit From a small amount of sample
產品貨號:ALH022
產品規(guī)格:50次
本試劑盒zuì小處理量可以處理10個以上的組織細胞。本試劑盒是在無苯酚、lǜ仿RNA快速提取技術基礎上,采用基因組DNA清除柱技術確保有效清除gDNA殘留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、熒光定量PCR等實驗。獨特的裂解液迅速裂解微量樣品的細胞和滅活細胞RNA酶,然后裂解混合物通過一個基因組DNA清除柱,基因組DNA被清除而RNA穿透濾過。濾過的RNA用乙醇調節(jié)結合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于特制離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質去除, zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。
試劑盒組份:
裂解液RLT Plus—————————20 ml
去蛋白液RW1———————————40ml
漂洗液RW————————————10ml
RNase-free H2O—————————10ml
70%乙醇————————————10ml RNase-free H2O
Carrier RNA——————————310μg
基因組DNA清除柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管———————50套
微量研磨杵———————————3根
儲存條件:室溫,有效期半年。(Carrier RNA需-20℃保存)
產品特點:
1.完全不使用有毒的苯酚,lǜ仿等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.快速,簡捷,單個樣品操作一般可在30分鐘內完成。
3.獨特研發(fā)成功基因組DNA清除柱技術確保有效清除gDNA殘留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、熒光定量PCR等實驗。
4.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.9~2.0,基本無DNA殘留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各種實驗。
注意事項:
注意事項
1. 所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉速可以達到13000rpm的傳統(tǒng)臺式離心機,如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 樣品處理量不要超過基因組吸附柱和和RNA吸附柱處理能力,否則造成DNA殘留或者產量降低。如細胞處理量不超過5×10^5,組織不超過5mg。
3. 一般本試劑盒zuì小處理量可以處理10個以上的組織細胞。
4. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. Carrier RNA 儲存液的配制:在次使用Carrier RNA 時,將Carrier RNA(310μg)溶解在1 ml RNase-free H2O 中,將溶液分裝后儲存于-20℃,此時該溶液的濃度為310 μg/ m(l 310 ng/μl);該儲存液應避免反復凍融,凍融次數(shù)不能超過3 次。(當處理的細胞量小于5000 個或者處理組織量小于10μg時,請在裂解液中加入20ng Carrier RNA。)
6. Carrier RNA 工作溶液的配制(以配制10 次用量為例):將5μl Carrier RNA儲存溶液加入34μl 裂解液RL 中,用移液器混勻,將混勻后的溶液6μl 加入54μl 裂解液RL 中, 此時Carrier RNA 終濃度為4 ng/μl,取5μl 終濃度為4 ng/μl 的Carrier RNA 加入裂解液中。
7. 預防RNase 污染,應注意以下幾方面:
1) 經常更換新手套。因為皮膚經常帶有細菌,可能導致RNase 污染。
2) 使用無RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT Plus 中時不會被RNase 降解。但提取后繼續(xù)處理過程中應使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小時,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分鐘,然后用水徹底清洗,再滅菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液應使用無RNase 的水。(將水加入到干凈的玻璃瓶中,加入DEPC 至終濃度0.1%( v/v),37℃放置過夜,高壓滅菌。)
8. 關于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA 提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA 的微量殘留(DNase 消化也無法做到無殘留),本試劑盒由于采取了本公司獨特的緩沖體系和基因組DNA 清除柱技術,大多數(shù)DNA 已經被清除,不需要DNase消化,可直接用于反轉錄PCR和熒光定量PCR。個別特殊情況如DNA 含量過于豐富造成殘留或者要進行嚴格的mRNA 表達量分析熒光定量PCR,我們建議在進行模板和引物的選擇時:
1) 選用跨內含子的引物,以穿過mRNA 中的連接區(qū),這樣DNA 就不能作為模板參與擴增反應。
2) 選擇基因組DNA 和cDNA 上擴增的產物大小不一樣的引物對。
3) 將RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 處理以提果。本試劑盒還可以用于DNase I 處理后的RNA 清潔(cleanup),請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
4) 在步驟去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上進行DNase I 處理。請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
本制品別名:少量樣品RNA提取試劑盒|珍稀樣品RNA提取試劑盒
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