BTN3191 Tris飽和酚

Tris飽和酚是高品質(zhì)的RNA提取純化產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于科學(xué)研究,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多Tris飽和酚等RNA提取純化產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括Tris飽和酚在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Tris飽和酚
英文名稱:Tris-Saturated Phenol
產(chǎn)品貨號(hào):BTN3191
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
本產(chǎn)品是將重蒸酚用Tris-HCl(pH8.0)緩沖液充分飽和而得,pH在8左右,不會(huì)再吸收樣品中的水分。它可用于DNA提取時(shí)去除蛋白質(zhì)。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存、避光。有效期一年。
疑難解答:
Q:提取DNA時(shí)一定要用Tris飽和酚嗎?
A:不一定,zuì重要的是pH,Tris(其實(shí)是Tris-HCl)只是pH緩沖液,用其飽和酚的目的是提高酚的pH。如果用其他緩沖液使酚的pH升高到7以上,也可以用于DNA純化。如果低于此pH,DNA可能會(huì)進(jìn)入酚相而丟失。
根據(jù)您的關(guān)注的Tris飽和酚,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱:糞便RNA柱式提取試劑盒
貨號(hào):BTN101109
規(guī)格:50次
由于糞便中有機(jī)質(zhì)含量豐富,對(duì)RT-PCR等后續(xù)反應(yīng)有大的抑制作用,所以從糞便中提取高純度的RNA一直是十分棘手的問題。本產(chǎn)品是在糞便RNA提取試劑盒基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式糞便RNA提取產(chǎn)品。
試劑盒特點(diǎn):
1. 操作比非柱式法更加簡(jiǎn)單快速,處理一個(gè)樣品只需要約十幾分鐘。
2. 去污染效果好,RNA 純度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA 合成等實(shí)驗(yàn)。
4. 高于進(jìn)口的柱式糞便RNA提取產(chǎn)品。
5. 試劑無(wú)害,環(huán)保。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A | 50ml |
| 酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 離心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脫液 | 10ml |
| 說(shuō)明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期兩年。
使用方法:
1.在自備的3-5mL離心管中稱取0.5-1 g 糞便,加入0.5g 玻璃珠和1mL溶液A,蓋緊離心蓋后震蕩器上劇烈震蕩5-10分鐘。注意:如果放置在低溫,溶液A可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
2. 稍微靜置后將上清液(一般呈棕色)轉(zhuǎn)移至一個(gè)干凈的1.5mL塑料離心管中。所取上清液不要超過1mL,否則后續(xù)操作沒有足夠空間。
3.在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備lǜ仿,在振蕩器上振蕩30秒混勻。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來(lái)。
4.室溫12000rpm離心3~5分鐘。
5. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),避免觸及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入等體積的溶液C,用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻,此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。
7.室溫12000rpm離心3分鐘,兩相間將有白色膜狀物(蛋白質(zhì))形成。
8. 將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,套入收集管中厚12000rpm室溫離心半分鐘,棄收集管中的穿透液。
9. 將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,套入收集管中后12000rpm室溫離心半分鐘,棄收集管中的穿透液。
10. 加0.7mL 通用洗柱液,套入收集管中后室溫離心半分鐘,棄收集管中的穿透液。
11. 加0.3mL 通用洗柱液,套入收集管中后室溫離心半分鐘,棄收集管中的穿透液。此步可以省略。
12. 將離心吸附柱套入收集管中后室溫離心半分鐘,棄含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。
13. 將離心吸附柱套入到一個(gè)自備的RNase-free 收集管中,加入30-100μL RNA洗脫液,室溫放置1-2分鐘。
14. 12000rpm室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的電泳檢測(cè):如果需要做Northern雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定:將5-10μl RNA 溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X 體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。
17. RNA 純度測(cè)定:無(wú)污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。
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