高速逆流色譜儀 ---日本System公司
介紹
高速逆流色譜是液相色譜的一種新技術(shù)，無需載體，從幾種色譜原理方法可以清晰說明。
大約50年前，根據(jù)對兩種液體進(jìn)行分配的理念，產(chǎn)生了兩種相似的方法：逆流分配技術(shù)和液-液色譜分配技術(shù)，即：逆流色譜和液相色譜。30年前，日本Sanki Engineering Ltd.利用前一種技術(shù)開發(fā)出了高性能的逆流色譜儀（HPCPC），它結(jié)合了液相色譜中的快速、高效和先進(jìn)技術(shù)。HPCPC尤其在利用色譜技術(shù)進(jìn)行半制備和全制備的應(yīng)用中倍受矚目，它和采用色譜柱技術(shù)的液相色譜在四個方面具有顯著優(yōu)勢：
● 無樣品損失：因?yàn)榱鲃酉嗪凸潭ㄏ喽际且后w，樣品可以全部回收。
● 大容量和高的分離能力：流動相和固定相的體積比明顯很高，從而無需更大的理論塔板數(shù)，就可以獲得更大的容量和更高的分離能力。
● 十分靈活的兩相系統(tǒng)：（兩種、三種、四種溶劑混合）為了獲得一種純的化合物，實(shí)驗(yàn)中需要比較靈活的更改流動相，HPCPC可以很方便地調(diào)整兩相的極性。
● 溶劑消耗少：相對于色譜柱制備系統(tǒng)，對于同樣的制備量，HPCPC的溶劑消耗量只有十分之一，使用逆流色譜在實(shí)驗(yàn)室完成分離后，可以直接放大到生產(chǎn)規(guī)模。
● 固定相價格低：另一個顯著優(yōu)點(diǎn)是逆流色譜的固定相是溶劑，相比色譜柱中的填充材料價格低很多；而且固定相可以很容易再生，一些添加的物質(zhì)如手性選擇劑或復(fù)雜的配位體可以無損失地回收，國際上出版的論文可以提供十分有用的信息和應(yīng)用參考。
新型的高速逆流色譜儀HPCPC廣泛地應(yīng)用于化學(xué)領(lǐng)域的純化，如抗生素、縮氨酸、丹寧酸、皂角苷、油脂、藥品等，將來的發(fā)展可以預(yù)見更大規(guī)模和產(chǎn)量的HPCPC設(shè)備出現(xiàn)，在化學(xué)領(lǐng)域?qū)⒏訌V泛地應(yīng)用，如手性藥物分離等。
與傳統(tǒng)制備液相的優(yōu)勢
● 逆流色譜儀HPCPC十分快速
由于固定相溶劑通過離心力保留在分配通道中，可以不用顧及分離精度的高低要求而讓流動相的流速保持很高。
● 明顯優(yōu)于傳統(tǒng)制備液相
由于逆流色譜儀HPCPC不需要固定相，不會出現(xiàn)對十分昂貴的樣品產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的保留，而在傳統(tǒng)色譜柱的液相色譜中，經(jīng)常出現(xiàn)的變性和分解現(xiàn)象在逆流色譜不會產(chǎn)生，同時保留了原來的生物活性。而且在相同體積情況HPCPC柱子（轉(zhuǎn)子）的容量明顯比HPLC高很多，因而過載情況在HPCPC中幾乎不可能發(fā)生，大量樣品的純化可以連續(xù)運(yùn)行，近似100%的回收，不存在吸附和不可逆轉(zhuǎn)的保留。
● 無需色譜柱和填料更換
傳統(tǒng)色譜由于空隙的形成、硅膠的污染、上次運(yùn)行樣品成份的保留將不得不經(jīng)常更換昂貴的HPLC色譜柱。
● 只需很少的理論塔板數(shù)
兩峰之間要獲得理想的分離效果，HPCPC相比HPLC而言，只需很少的理論塔板數(shù)，例如：a（選擇性）=1.2和K（分配系數(shù)）=1，HPLC獲得基線分辨率（Rs=1.5）需要185000個理論塔板數(shù)，而HPCPC只需要2200個理論塔板數(shù)，這是從液相色譜的標(biāo)準(zhǔn)分離度方程式推算出來的結(jié)果。
● 在相同的運(yùn)行中，即可實(shí)現(xiàn)正相色譜，又可實(shí)現(xiàn)反相色譜
使用雙模式HPCPC，幾乎可以完成所有要求的樣品分離，包含極性/非極性、親水性/非親水性的復(fù)雜混合物，使用合適的手性HPCPC相還可以完成手性物質(zhì)的分離。
● 任何PH情況下都可以工作
HPCPC不需要考慮PH范圍的限制要求，而對于使用固體作為固定相支持情況下，經(jīng)常有對PH值的要求。
HPCPC技術(shù)創(chuàng)新，克服了以前逆流色譜的一些弊端
● 以前逆流色流的弊端(1):當(dāng)分離目標(biāo)比較復(fù)雜時，需要運(yùn)行很長時間
HPCPC通過創(chuàng)新自動化系統(tǒng)，克服了上述的弊端：
1) 執(zhí)行分離任務(wù)可以預(yù)先設(shè)定10個方案。
2) 執(zhí)行分離任務(wù)時可綜合分析不同分離條件（溶劑，旋轉(zhuǎn)，流量等），考慮連續(xù)多個方案中彼此間聯(lián)系，從而選擇適條件。
3) 連續(xù)相同的多任務(wù)分離工作，在固定相一樣的情況下，可以很容易完成（相同的條件下，樣品的分離手段重現(xiàn)性非常好），也可輕松連接自動進(jìn)樣器和餾分收集器，自動完成。
4) 通過與計(jì)算機(jī)的數(shù)據(jù)采集程序相連接，很容易對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理；也可以使用計(jì)算機(jī)中預(yù)置的程序。
● 以前逆流色流的弊端(2):要很長時間才能確定合適的分離條件
HPCPC通過提供小的轉(zhuǎn)子，只有以前型號1/3的體積來克服了上述的弊端：
HPCPC原理
HPCPCTM是一個新的液相色譜技術(shù)，利用液液兩相的逆流分配，在沒有固體填料的情況下，執(zhí)行復(fù)雜的化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑替代了傳統(tǒng)的制備型高效液相色譜填充柱為固定相和另一液體溶劑做流動相在一個高性能的離心系統(tǒng)分區(qū)進(jìn)行操作。不需使用固態(tài)固定相，而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力場將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中。傳統(tǒng)固態(tài)填充柱的分離量一般只包含2%-7%的固定相重量中，嚴(yán)重限制了它的分離能力，而在HPCPC系統(tǒng)中該列包含50%-80%于固定相中，分離能力大大提高。固定相液體分散于眾多的腔體單元中，流動相液體微滴通過不斷通過固定相液體從而分離各個成分。在任意兩相混合溶劑和任何PH值條件下，都能進(jìn)行正相和反相色譜分離。
注入一個樣品后，通過流動相帶入逆流色譜儀中，使之進(jìn)入廣泛分布在一系列的管道腔體中，在其分配系數(shù)差異的基礎(chǔ)上洗脫，同時各組分間在兩相液體中相互分離。
HPCPC正相及反相一次雙向洗脫模式
在一個兩相溶劑系統(tǒng)中，可以通過正相或反相洗脫來實(shí)現(xiàn)其分離過程，雙向模式的HPCPC分離 5個組分混合物（a,b,c,d和e）的過程如下，其中它們的分配系數(shù)為a＞b＞c＞d＞e。
（1）正相分離 （2）正相洗脫
(1) 分配系數(shù)較大的組分（a和b）主要是存在與下層親和力強(qiáng)的固定相中。
(2) 分配系數(shù)較小的組分（c,d和e）隨著上層流動相洗脫依次分離，同時固定相中的a和b組分相互之間也在緩慢分離。
（3）回流 （4）反相洗脫
(3) 在組分c,d和e洗脫完成之后，上層流動相繼續(xù)循環(huán)洗脫至組分a和b完全分離。
(4) 改變上下相使之相反后原下層為流動相，同時洗脫方向反向從而分離出組分a和b。
（5）一次雙相洗脫示意圖
技術(shù)參數(shù)
● zui高轉(zhuǎn)速：2000RPM
● 轉(zhuǎn)速：1500RPM
● 清洗轉(zhuǎn)速：300RPM
● zui小流量：0.1ml/min
● zui大流量：30ml/min
● 清洗流量：20ml/min
● 流量：5ml/min
● 進(jìn)樣閥：四通開關(guān)閥
● 顯示屏：LCD顯示
● 轉(zhuǎn)子材質(zhì)：PPS和不銹鋼
● 轉(zhuǎn)盤數(shù)量：4個轉(zhuǎn)盤/1組
● 轉(zhuǎn)子尺寸：Φ200/H80mm
● 分割池?cái)?shù)量：2136
● 分割池長度：15mm
● 離心半徑：82.5mm
● 柱體積：240ml
● zui大壓力：60kg/cm2
● 安全保護(hù)：開蓋自動停止
● 進(jìn)出口管線：1/16”(內(nèi)徑0.75mm，外徑1.0mm)
● 轉(zhuǎn)子重量：7kg
● 外形尺寸：330x475x480mm
● 重量：43kg
● 電壓：220V/50Hz/3A
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