? 增強型ATP檢測試劑盒(Enhanced ATP Assay Kit)可以用于檢測普通溶液、細胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5’-triphosphate)水平。細胞和組織樣品一步裂解即可完成樣品制備，檢測靈敏度高達0.1nmol/L，化學發(fā)光可以持續(xù)穩(wěn)定達30分鐘。本試劑盒的多項指標優(yōu)于許多國外的同類產(chǎn)品。并且獲得的樣品還可以同時進行Western檢測。
? ATP，作為重要的能量分子，在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變，會影響細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會下降；而高葡萄糖刺激等可上調(diào)某些細胞的細胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降，在細胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發(fā)生。
? 樣品制備非常簡單。本試劑盒提供了可以用于細胞和組織裂解的ATP檢測裂解液，簡單裂解后即可用于ATP檢測。無需進行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提，或樣品裂解后的煮沸等繁瑣操作。
? 本試劑盒根據(jù)螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)催化熒光素產(chǎn)生熒光時需要ATP提供能量研制而成。當螢火蟲熒光素酶和熒光素都過量時，在一定的濃度范圍內(nèi)熒光的產(chǎn)生和ATP的濃度成正比。這樣就可以高靈敏地檢測溶液中的ATP濃度。本試劑盒在樣品體積為100微升時可以檢測濃度低達0.1nmol/L的ATP。而常規(guī)的細胞或組織裂解液中ATP的濃度僅為0.1-1μmol/L，一些常見細胞的細胞內(nèi)ATP水平約為10nmol/mg蛋白。并且本試劑盒的檢測濃度范圍非常大，檢測上限可以高達10μmol/L，并在0.1nmol/L-10μmol/L范圍內(nèi)可以形成良好的標準曲線。
? 本試劑盒進行了特殊的優(yōu)化設(shè)計，使檢測ATP時的化學發(fā)光非常穩(wěn)定。對于ATP標準曲線的檢測結(jié)果顯示，在開始反應后10分鐘內(nèi)化學發(fā)光無明顯下降，開始反應后30分鐘內(nèi)化學發(fā)光的下降不超過10%。
? 使用本試劑盒中的ATP檢測裂解液裂解獲得的細胞或組織樣品，不僅可以用于ATP檢測，還可用于檢測蛋白濃度、進行SDS-PAGE或一些常規(guī)的較易溶解蛋白的Western檢測。
? 本試劑盒的使用方便快捷，通常10-20個樣品可以在30-60分鐘內(nèi)測定完畢。
? 一個包裝的本試劑盒至少可以進行200次測試。
保存條件：
-20ºC保存，半年有效。-70ºC保存，一年有效。ATP檢測試劑需避光保存。
注意事項：
? ATP檢測試劑中含有熒光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試ATP檢測試劑反復凍融5次對于其檢測效果無明顯影響，為取得良好的使用效果，建議用戶使用時的凍融次數(shù)不宜超過3次。ATP檢測試劑稀釋成ATP檢測工作液后，一次用完，不宜凍存后再使用。
? ATP，特別是裂解后樣品中的ATP在室溫不太穩(wěn)定，需在4ºC或冰上操作。ATP在冰上可以穩(wěn)定長達6小時。
? 本試劑盒需使用luminometer，即化學發(fā)光檢測儀(檢測熒光素酶報告基因時所用的儀器)。如果沒有l(wèi)uminometer，也可以使用液閃儀。液閃儀的測定效果取決于液閃儀的檢測靈敏度和檢測精度。
? 使用可檢測化學發(fā)光的多功能酶標儀時，所用96孔板宜為孔和孔之間不透光的黑板或白板。如使用常規(guī)的透明96孔板，需特別注意正確設(shè)置酶標儀測定時板子的類型，同時也可以在檢測孔之間設(shè)置間隔孔，以盡量避免鄰近孔之間的相互干擾。
? 本試劑盒提供的ATP檢測裂解液可以有效裂解并釋放常見的培養(yǎng)細胞和組織中的ATP。對于一些特殊的組織或樣品，如果發(fā)現(xiàn)檢測出來的ATP水平顯著低于預期水平，可以在裂解樣品后并且在離心前，取部分樣品煮沸2分鐘以充分釋放ATP。煮沸后樣品中的蛋白會變性，從而會在后續(xù)的離心步驟中被沉淀，因此煮沸的樣品不能用于蛋白濃度測定、SDS-PAGE和Western檢測?？梢允褂檬Ｓ嗟牟糠謽悠愤M行蛋白濃度測定、SDS-PAGE和Western檢測。
? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
