小鼠腦神經瘤細胞, Neuro-2a細胞

小鼠腦神經瘤細胞, Neuro-2a細胞 素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。...
素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。
小鼠腦神經瘤細胞, Neuro-2a細胞
動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術
一節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術應用簡介
通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術培養(yǎng)哺乳類動物細胞是生產生物制品的有效方法。2060-70年代,就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細胞培養(yǎng)技術。近十數年來,由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細胞介素等生物制品的需求猛增,以傳統(tǒng)的生物化學技術從動物組織獲取生物制品已遠遠不能滿足這一需求。隨著細胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善,動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術趨于成熟。
所謂動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(large-scale culture technology)是指在人工條件下(設定ph、溫度、溶氧等),在細胞生物反應器(bioreactor)中高密度大量培養(yǎng)動物細胞用于生產生物制品的技術。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍體細胞、cho(中華倉鼠卵巢)細胞、BHK-21(倉鼠腎細胞)、Vero細胞(非洲綠猴腎傳代細胞,是貼壁依賴的成纖維細胞)等,并已成功生產了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細胞生成素、單克隆抗體等產品。
在過去幾十年來,該技術經有了很大發(fā)展,從使用轉瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細胞培養(yǎng),發(fā)展為生物反應器(Bioreactor)進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)。一代細胞培養(yǎng)技術核心問題是難以產業(yè)化或者說是規(guī)模化生產:一是在工藝生產時不能大規(guī)模制備產品;二是非批量生產容易導致產品質量的不均一性;三是難以對同批生產進行生產和質量控制。
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SUER0572(XR) U266細胞,人外周淋巴細胞
SUER0573(XR) IM-9細胞,人外周血B淋巴細胞
SUER0574(XR) CCL-120細胞,人外周血淋巴細胞
SUER0575(XR) MC/CAR細胞,人外周血淋巴細胞
SUER0576(XR) KU812細胞,人外周血嗜堿性白細胞
SUER0577(XR) GES-1細胞,人胃黏膜上皮永生系細胞
SUER0578(XR) TEC細胞,人胸腺上皮細胞
SUER0579(XR) VE 細胞,人血管內皮細胞
SUER0580(XR) CRL-1999 T/G HA-VSMC細胞,人血管平滑肌細胞
SUER0581(XR) T/G HA-VSMC細胞,人血管平滑肌細胞
SUER0582(XR) HSC細胞,人血旺細胞
SUER0583(XR) HGF-1細胞,人牙齦成纖維細胞
SUER0584(XR) NP69-SV40T細胞,人永生化鼻咽上皮細胞
SUER0585(XR) ?HaCaT細胞,人永生化表皮細胞
SUER0586(XR) Hacat細胞,人永生化角質形成細胞
SUER0587(XR) HSPC-1細胞,人造血干細胞
SUER0588(XR) Chang liver細胞,人張氏肝細胞
SUER0589(XR) HBL-100細胞,人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
SUER0590(XR) WPMY-1細胞,人正常前列腺基質永生化細胞
SUER0591(XR) HTB-125細胞,人正常乳腺細胞
SUER0592(XR) Hs 578Bst細胞,人正常乳腺細胞
SUER0593(XR) 16HBE細胞,人支氣管上皮樣細胞
SUER0594(XR) BEAS-2B細胞,人支氣管上皮樣細胞
SUER0595(XR) HBE細胞,人支氣管上皮樣細胞
SUER0596(XR) HA-VSMC細胞,人主動脈血管平滑肌細胞
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隨著生物技術的發(fā)展,迫切需要大規(guī)模的細胞培養(yǎng),特別是培養(yǎng)表達特異性蛋白的哺乳動物細胞,以便獲得大量有用的細胞表達產物。采用玻璃瓶靜置或旋轉瓶的培養(yǎng)方法,已不能滿足所需細胞數量及其分泌產物。因而必須為工業(yè)化生產一種新的技術方法。自70年代以來,細胞培養(yǎng)用生物反應器有很大的發(fā)展,種類越來越多,規(guī)模越來越大,較常見的細胞培養(yǎng)生物反應器有空氣提升反應器,中空纖維管反應器,無泡攪拌反應器及籃式生物反應器等。八十年代以來,人們逐漸開始以生物反應器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。
動物細胞是一種無細胞壁的真核細胞,生長緩慢,對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術進行動物細胞大量培養(yǎng),除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外,有必要建立合理的控制模型,進行pH和溶氧(DO)的控制。細胞生物反應器可通過微機有序地定量地控制加入動物細胞培養(yǎng)罐內的空氣、氧氣、氮氣和二氧化碳四種氣體的流量,使其保持的比例來控制細胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平,使系統(tǒng)始終處于狀態(tài),以滿足動物細胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內氣體中氧氣和氮氣的比例來實現控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉(CO2/NaHCO3)緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。
現在,由于動物細胞培養(yǎng)技術在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展,且從中得到的蛋白質也被證明是安全有效的,因此人們對動物細胞培養(yǎng)的態(tài)度已經發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質藥物和疫苗,尤其是那些相對較大、較復雜或糖基化(glycosylated)的蛋白質來說,動物細胞培養(yǎng)是的生產方式。60年代初,英國AVRI研究所在貼壁細胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后,從初的200ml和800ml玻璃容器開始,很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基,補充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后,Wellcome(現為Cooper動物保?。┘瘓F分布于歐洲、非洲和南美洲8個的生產廠商,應用此項技術工業(yè)規(guī)?;a口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗,已掌握了5000L的細胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術。
目前已實現商業(yè)化的產品有:口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中,口蹄疫疫苗是動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產的主要產品之一。1983年,英國Wellcome公司就已能夠利用動物細胞進行大規(guī)模培養(yǎng)生產口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應用SV40為載體,將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動物細胞內進行表達,已生產出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細胞生產α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應器生α、β和γ干擾素;用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應器中培養(yǎng)雜交瘤細胞生產單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應器大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞生產出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等
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