HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞，培養(yǎng)基（以說明書為準(zhǔn)） +10%FBS(SERANA胎牛血清)，上海素爾細胞庫，供應(yīng)細胞種類！...

細胞名稱	HaCaT細胞
細胞形態(tài)圖200×
細胞來源	人皮膚
細胞簡介	HaCaT細胞為人永生化表皮細胞，來源于人皮膚，中文名為人永生化表皮細胞，正常的細胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長。
培養(yǎng)基	DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養(yǎng)條件	37℃ 5% CO2
消化條件	0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液，消化5-10min
傳代比例	1：4-1：10
換液時間	2-3天換液一次
凍存液比例	80%培養(yǎng)基，10%FBS, 10% (v/v) DMSO
凍存密度	1-3 ×10 6/管，液氮保存

HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞，90%DMEM+10%FBS(SERANA胎牛血清)，上海素爾細胞庫，供應(yīng)細胞種類400多種，來源可靠，可做STR鑒定！

HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞 一、細胞的凍存:為避免污染造成的損失，zui小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。

有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：

◆包含10%甘油的完全培養(yǎng)基，

◆包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基，

◆50% 細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基，或

◆50% 細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。

對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：

◆50% 細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基，或

◆包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。

HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞1.懸浮細胞

●計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200～400g離心5分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到zui小體積，不要攪亂細胞。

●以1×107到5×107細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以0.5×107到1×107在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。

●分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中，5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。

●細胞以1℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。

HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞2.貼壁細胞

●使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到zui小。

●在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。

●以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到zui小體積，不要攪亂細胞。

●以5×106到1×106細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。

●分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中，5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。

●細胞以1℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存

HaCaT細胞@ATCC細胞@人永生化表皮細胞，相關(guān)胎牛血清，上海素爾，庫存量大，原裝！
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