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產(chǎn)品詳情

A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物

  • 產(chǎn)品/服務(wù):A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物
  • 型 號:A375
  • 品 牌:慧穎生物
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2020-04-21
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1120
產(chǎn)品簡介

A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物,上海素爾生物科技有限公司是專業(yè)的細胞代理供應(yīng)商,公司有專業(yè)的團隊,提供專業(yè)的細胞服務(wù),為客戶提供高品質(zhì)的科研細胞及相關(guān)產(chǎn)品,價格優(yōu)惠,提供專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),保證品...

產(chǎn)品詳細介紹
 A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物,上海素爾生物科技有限公司是專業(yè)的細胞代理供應(yīng)商,公司有專業(yè)的團隊,提供專業(yè)的細胞服務(wù),為客戶提供高品質(zhì)的科研細胞及相關(guān)產(chǎn)品,價格優(yōu)惠,提供專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),保證品質(zhì),歡迎來電咨詢。

 A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物 簡介:

產(chǎn)品名稱:A375

中文名稱:人黑色素瘤細胞

庫存狀態(tài):現(xiàn)貨

細胞規(guī)格:株

質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)

運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸

貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸?shù)男枰?-3天

A375細胞,人黑色素瘤細胞,素爾生物,質(zhì)粒的相關(guān)知識:
一.如何閱讀質(zhì)粒圖譜
一步:先看 Ori 的位置,了解質(zhì)粒的類型(原核/真核/穿梭質(zhì)粒)。
第二步:再看篩選標(biāo)記,如抗性,決定使用什么篩選標(biāo)記。
--Ampr   水解β-內(nèi)酰胺環(huán),解除氨芐的毒性;
--tetr   可以阻止四環(huán)素進入細胞;
--camr   生成氯霉素羥乙?;苌铮怪ザ拘?;
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418(長那霉素衍生物)失活;
--hygr   使潮霉素β失活。
第三步:看多克隆位點(MCS)。它具有多個限制酶的單一切點,便于外源基因的插入。如果在這些位點外有外源基因的插入,會導(dǎo)致某種標(biāo)志基因的失活,從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來說,外源DNA片段越長,越難插入,越不穩(wěn)定,轉(zhuǎn)化效率越低。
第五步:是否含有表達系統(tǒng)元件,即啟動子-核糖體結(jié)合位點-克隆位點-轉(zhuǎn)錄終止信號,這是用來區(qū)別克隆載體與表達載體。在克隆載體中加入一些與表達調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達載體。選用哪種載體,要以實驗?zāi)康臑橐罁?jù)。
二.如何選擇載體
把目的基因通過基因工程手段送到生物細胞(受體細胞),需要運載工具(交通工具)攜帶外源基因進入受體細胞,這種運載工具就叫做載體(vector)?;蚬こ趟玫膙ector實際上是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的 DNA。
選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的,同時要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點。如果構(gòu)建的目的是要表達一個特定的基因,則要選擇合適的表達載體。
載體選擇主要考慮下述3點:
1. 構(gòu)建DNA重組體的目的:克隆載體/表達載體。
2. 載體的類型:
克隆載體的克隆能力:根據(jù)克隆片段大?。ù筮x大,小選?。?。如<10kb選質(zhì)粒。
表達載體:根據(jù)受體細胞類型:原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳類細胞表達載體。
原核表達載體要選擇合適的啟動子及相應(yīng)的受體菌;表達真核蛋白時需注意閱讀框錯位問題;表達天然蛋白和融合蛋白所需載體亦有區(qū)別。
3. 選用質(zhì)粒做載體的4點要求:
(1)選分子量小的質(zhì)粒,即小載體(1~1.5 kb):不易損壞,在細菌里面拷貝數(shù)也多(也有大載體);
(2)一般使用松弛型質(zhì)粒在細菌里擴增不受約束,一般10個以上的拷貝,而嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒<10個。
(3)必需具備一個以上的酶切位點,有選擇的余地;
(4)必需有易檢測的標(biāo)記,多是抗生素的抗性基因。
無論選用哪種載體,先都要獲得載體分子,然后采用適當(dāng)?shù)南拗泼笇⑤d體DNA進行切割,獲得載體片段,以便于與目的基因片段進行連接。

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