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MKN-45| MKN-45現(xiàn)貨|人胃癌細胞，貼壁生長，上皮細胞，上海素爾細胞庫所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質量檢測和鑒定，出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質檢認證，以確保細胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)。咨詢、：！

MKN-45| MKN-45現(xiàn)貨|人胃癌細胞注意事項：

1、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置半小時后在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行拍照（建議收到細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100，200各兩張，拍攝照片應清晰），排除細胞本身污染的情況；

2、細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。如有問題一時間跟我們聯(lián)系 ！

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完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640 +10%胎牛血清+1%P/S

血清我們推薦用:Gibco FBS-10099-141 或SERANA 北美 S-FBS-US-015

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

MKN-45| MKN-45現(xiàn)貨|人胃癌細胞傳代方法：

收到細胞后，在倒置鏡下(是在 4X 物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內， 嚴 格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml 新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用 PBS（不含鈣,鎂離子）洗 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱 1-3 分鐘預熱，之后翻轉培養(yǎng)瓶 10-30 秒后，在倒置顯微鏡下 觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的一次傳代一般是一傳二。 注：1、觀察細胞在低倍鏡（4 或 5X 物鏡)下進行，否則不能準確判 斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在 10 或 20 物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍 存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與 我們聯(lián)系。

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