上海素爾細胞庫為您提供人食管癌細胞KYSE30細胞（復(fù)蘇細胞、凍存細胞）具體細胞培養(yǎng)條件，代數(shù)以及來源問題請與在線客服聯(lián)系咨詢。 》》在線客服QQ1提供耐藥細胞株，細胞染色等技術(shù)服務(wù)。...

上海素爾細胞庫為您提供人食管癌細胞KYSE30細胞（復(fù)蘇細胞、凍存細胞）具體細胞培養(yǎng)條件，代數(shù)以及來源問題請與在線客服聯(lián)系咨詢。 》》在線客服:提供耐藥細胞株，細胞染色等技術(shù)服務(wù)。

人食管癌細胞KYSE30細胞描述：

生長特性：貼壁生長

形態(tài)特征：上皮細胞

微生物及支原體檢測：陰性

人食管癌細胞KYSE30細胞培養(yǎng)條件：

完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640 +10%胎牛血清+1%P/S

血清我們推薦用:

GibcoFBS：10099-141或HycloneFBS：SH30084.03。

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

人食管癌細胞KYSE30細胞收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的一次傳代一般是一傳二。

人食管癌細胞KYSE30細胞注意事項：

注：1 、觀察細胞在低倍鏡（4 或5X 物鏡) 下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10 或20 物鏡下。

2 、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用, 請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后, 培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3 、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4 、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯(lián)系 ！

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