293FT表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣 生長特性：半貼壁生長培養(yǎng)體系：DMEM+10%FBS 細(xì)胞狀態(tài)良好，訂購熱線！...

細(xì)胞名稱：293FT表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：半貼壁生長

培養(yǎng)體系：DMEM+10%FBS

傳代方法：1:2

傳代情況：2-3天換頁

凍存條件：90%FBS+10%DMSO

支原體檢測：陰性

備注：疏松貼壁，可直接吹打

我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞后，因運(yùn)輸途中細(xì)胞會有分泌物，所以原瓶中的培養(yǎng)液不能循環(huán)利用，將其全部倒掉，使用自己實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基（用推薦使用的培養(yǎng)基）

293FT表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞購買細(xì)胞注意事項(xiàng)：

客戶收到細(xì)胞后請務(wù)必仔細(xì)閱讀細(xì)胞注意事項(xiàng)，確保細(xì)胞的培養(yǎng)條件一致，如果由于培養(yǎng)條件不一致導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任有客戶自行承擔(dān)。

1. 客戶在收到細(xì)胞時(shí)，請先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問題，請?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們聯(lián)系。

2. 由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請離心收集，重懸細(xì)胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁，請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。

3．收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。

293FT表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞貼壁細(xì)胞處理方法：

一、 細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作。

二、 鏡下觀察：

未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml完全培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮完全培養(yǎng)基培養(yǎng)）

三、消化方法

1、將瓶裝的完全培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮完全培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細(xì)胞完全脫離瓶壁分離成單個后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

注意：因天氣原因，若客戶收到2ml小管細(xì)胞:收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度，可直接進(jìn)行傳代（細(xì)胞貼壁處理方法）。

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