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TRlzol ®Reagent 大量庫存

TRIZOL LS Reagent 大量庫存

Lipofectamine RNAiMax 大量庫存

B-27（黃顏色）不含維生素A大量庫存

公司所提供的Invitrogen轉染試劑以及抽提試劑，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。

操作注意事項：

1、轉染前一天，胰酶消化細胞并計數，細胞鋪板，使其在轉染日密度為90%。細胞鋪板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生長的培養(yǎng)基中。

2、對于每孔細胞，使用50μl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋0.8μg-1.0μg DNA。3、對于每孔細胞，使用50μl OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基稀釋1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000試劑。Lipofectamine 2000稀釋后保溫5分鐘（在30分鐘內同稀釋的DNA混合。保溫時間過長會降低活性。） 注意：即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀釋，細胞也可以使用D-MEM培養(yǎng)。如果D-MEM做為Lipofectamine 2000的稀釋液，必須在5分鐘內同稀釋的DNA混合。

4、混合稀釋的DNA（第2步）和稀釋的Lipofectamine 2000（第3步）。在室溫保溫20分鐘。 注意：溶液可能會混濁，但不會影響轉染。復合物可以在室溫保持6小時穩(wěn)定。

5、直接將復合物加入到每孔中，搖動培養(yǎng)板，輕輕混勻。注意：如果在無血清條件下轉染，使用含血清的正常生長培養(yǎng)基進行細胞鋪板。在加入復合物前移去生長培養(yǎng)基，替換為0.5ml無血清培養(yǎng)基。

6、在37℃，5％的CO2中保溫24-48小時，無須去掉復合物或更換培養(yǎng)基或者在4-5小時后更換生長培養(yǎng)基也不會降低轉染活性。

7、在細胞中加入復合物24-72小時后，分析細胞抽提物或進行原位細胞染色，檢測報告基因活性。這依賴于細胞類型和啟動子活性。對穩(wěn)定表達，在開始轉染一天后將細胞傳代至新鮮培養(yǎng)基中，兩天后加入篩選抗生素。進行穩(wěn)定表達需要數天或數周。

8、對于96孔板培養(yǎng)，不再需要提前一天進行細胞鋪板，而可以直接在平板中制備復合物，然后將細胞懸浮液加入到復合物就可以了，這樣進一步減少了轉染時間。這種改進步驟已經過293-H，293-F，COS-7L和CHO細胞的試驗，同傳統(tǒng)方法相比活性稍低?？旖莸牟襟E和蛋白表達細胞系的轉染使得Lipofectamine 2000非常適用于96孔板的高通量轉染，比如cDNA文庫的篩選和蛋白瞬時表達。

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產品名稱：脂質體2000

英文名稱：Lipofectamine TM 2000 Reagent

別名：Lipo2000，脂質體轉染試劑，Lipofectamine 2000，lp2000脂質體

貨號及規(guī)格：11668-027（0.75ML）；11668-019（1.5ML）

儲存溫度：4°C

庫存狀態(tài)：現貨

特惠價格：電議

Invitrogen脂質體2000價格lipo2000說明書 素爾提醒您要注意避免多次反復長時間開蓋，因為可能會導致脂質體氧化而影響轉染效率。當然還有要注意質粒的質量，質粒的內毒素是轉染的大敵。

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