RNA建庫(kù)試劑盒產(chǎn)品，適合于illumina測(cè)序平臺(tái)，試劑盒中的每種組分都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

建庫(kù)流程
利用oligo dT磁珠，從總RNA純化得到mRNA，經(jīng)過(guò)片段化（300bp左右）、合成一鏈和二鏈cDNA，再通過(guò)末端修復(fù)、加A、連接接頭和PCR富集得到zui終的cDNA文庫(kù)。

Tips：RNA樣品檢測(cè)的4種主要方法
(1) 瓊脂糖凝膠電泳分析RNA降解程度以及是否有污染
(2) Nanodrop檢測(cè)RNA的純度（OD260/280比值）
(3) Qubit對(duì)RNA濃度進(jìn)行定量
(4) Agilent 2100檢測(cè)RNA的完整性

適應(yīng)范圍
樣本種類：動(dòng)、植物及真菌等真核生物的總RNA
建庫(kù)起始量：100ng-1.5μg，推薦RNA RIN值≥7
插入片段：150bp-200bp或250-300bp
注：以1.5μg小鼠總RNA為起始模板，caliper檢測(cè)文庫(kù)大小分布情況，主峰值在408bp左右

溫馨提示：
（1）RNA純化在室溫條件下操作，RNA樣本稀釋后冰上放置，并盡快進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)，避免RNA發(fā)生降解；
（2）RNA打斷條件以及后續(xù)片段篩選需要嚴(yán)格按照sop進(jìn)行，否則會(huì)影響文庫(kù)大小及產(chǎn)量；
（3）試劑盒中的產(chǎn)品組分，不可拆分，不可與其他品牌同種試劑配套使用，否則影響建庫(kù)結(jié)果。

RNA建庫(kù)試劑盒注意事項(xiàng)
1、試驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)，注意每個(gè)組分的保存溫度，確保實(shí)驗(yàn)順利完成。
2、Stranded Oligo需-80℃保存，使用時(shí)少量分裝使用。
3、操作過(guò)程請(qǐng)注意避免核酸樣品和產(chǎn)物之間的交叉污染。
4、請(qǐng)使用不含RNA酶或DNA酶的槍頭、EP管進(jìn)行試驗(yàn)。
5、建庫(kù)所使用的RNA必須是純化后質(zhì)檢合格的樣本，否則會(huì)嚴(yán)重影響建庫(kù)結(jié)果；
6、實(shí)驗(yàn)所用磁珠應(yīng)提前30分鐘自4℃環(huán)境中取出，平衡至室溫。所有磁珠操作均需置于室溫。
7、80%乙醇需現(xiàn)配現(xiàn)用，用其清洗磁珠后，需清除干凈，避免對(duì)后續(xù)反應(yīng)產(chǎn)生影響。

                                                                                         （本文內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除）