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MRS培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng)
發(fā)布時(shí)間：2016-07-26瀏覽次數(shù)：2215返回列表
因?yàn)镸RS培養(yǎng)基的配制使用非常重要，從一開(kāi)始就該避免異常的出現(xiàn)，主要有以下幾個(gè)方面。
（1）溶化：一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi).加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時(shí)應(yīng)經(jīng)常攪拌,防止焦結(jié),待其溶解后補(bǔ)足水分.
在使用干燥培養(yǎng)基時(shí),先將蒸餾水按定量加入容器中,然后稱(chēng)取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中,靜置10—15min,攪拌,振蕩,或延長(zhǎng)時(shí)間以促進(jìn)溶解,一般不要熱,必要時(shí)加熱,但時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),溫度不宜過(guò)高,避免某些營(yíng)養(yǎng)成分被破壞.
（2） 校正酸堿度（調(diào)節(jié)pH）：培養(yǎng)基必須有適當(dāng)?shù)膒H.因此測(cè)定pH是培養(yǎng)基配制過(guò)程中的重要步驟之一,測(cè)定pH的標(biāo)準(zhǔn)溫度為25士2℃.調(diào)節(jié)pH可用無(wú)菌的 1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液.當(dāng)調(diào)節(jié)緩沖液的pH時(shí),宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液.滅菌后 的pH會(huì)比滅菌前的pH升高或降低,一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會(huì)比終pH調(diào)高0.2左右,滅菌后基本合適。
因此對(duì)培養(yǎng)基、緩沖液、試劑在滅菌前后的 pH均進(jìn)行測(cè)定,并記下每次pH的測(cè)定結(jié)果,有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基、緩沖液、試劑對(duì)滅菌程序的耐受性,從而指導(dǎo)滅菌前pH的調(diào)節(jié).干燥培養(yǎng)基一般已校正過(guò)pH,用時(shí)也必須再驗(yàn)證.測(cè)定時(shí),一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化,或用pH計(jì)校正,如與所需pH不符,可用以上的酸或堿液加以校正.調(diào) 整pH后要加熱過(guò)濾,使培養(yǎng)基澄清.
（3）培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時(shí)使用的自動(dòng)分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn).每次使用前后,均要對(duì)分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,在分裝無(wú)菌培養(yǎng)基前,則要采用無(wú)菌硅膠管.
