古朵生物 ELISA試劑盒試驗及應(yīng)用免疫檢測技術(shù)原理

  ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。將標準、樣品提取物和三聚氰胺酶標記物添加到現(xiàn)已包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。在30分鐘的培養(yǎng)過程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標記物競爭結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體，培養(yǎng)30分鐘后洗掉微孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標記物。在用稀釋的洗液清潔完畢后，每孔中添加清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍色的物質(zhì)。培養(yǎng)20分鐘后中止此反應(yīng)，根據(jù)各孔色彩深淺進行數(shù)據(jù)讀取。根據(jù)標準的色彩得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。

  ELISA試劑盒酶我們現(xiàn)已對能夠呈現(xiàn)在檢測樣品中的許多有機和無機物做了檢測，發(fā)現(xiàn)它們不與這個試劑盒產(chǎn)生交叉反應(yīng)。然而在樣品中也含有一些容易變質(zhì)的化合物，它們通過基質(zhì)影響來攪擾測定，如含脂肪的食物，它們在測定前要經(jīng)過稀釋來消除一些基質(zhì)對實驗結(jié)果的影響。在運用的過程中呈現(xiàn)失誤也會影響成果，例如試劑盒存儲的條件、汲取液體的程序、汲取液體的不、在產(chǎn)生免疫和底物反應(yīng)的過程中培養(yǎng)時間不。

  ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)

  (1)將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

  (2)加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時問，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。

  (3)加酶標抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成正相關(guān)。

  (4)加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量。

  根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理相抗原和酶標抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。

  用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。

  將樣品或標準品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)

  合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液。

  ELISA試劑盒酶在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。