C端mCherry標簽融合蛋白質(zhì)是高品質(zhì)的克隆與表達產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應，本產(chǎn)品用于科研試驗，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多C端mCherry標簽融合蛋白質(zhì)等克隆與表達產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括C端mCherry標簽融合蛋白質(zhì)粒(紅色熒光蛋白)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：C端mCherry標簽融合蛋白質(zhì)粒(紅色熒光蛋白)
英文名稱：C-mCherry plasmid（with CMV promoter）
產(chǎn)品貨號：YT467
產(chǎn)品規(guī)格：1μg

本質(zhì)粒是哺乳動物細胞表達質(zhì)粒，用于表達C端含mCherry (DsRed的突變體，一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的后面有一個mCherry的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達C端含有mCherry標簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內(nèi)定位，也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。

本質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Multiple cloning site	651-736
mCherry	741-1451
T7 promoter and T7 primer binding site	1501-1522
SV40 polyAsignal	1534-1917
f1 origin of ss-DNA replication	2055-2361
bla promoter	2386-2510
SV40 promoter	2530-2868
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2903-3694
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3695-4153
pUC origin	4282-4949

本質(zhì)粒(5001bp)的圖譜如下：


使用說明：
1. 次使用時請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 本質(zhì)粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，構(gòu)建的質(zhì)粒可以用常規(guī)方法轉(zhuǎn)染細胞。

儲存條件：-20℃。

根據(jù)您的關(guān)注的C端mCherry標簽融合蛋白質(zhì)粒(紅色熒光蛋白)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：



名稱：單細胞裂解液(DNA提取)
貨號：BTN130803
規(guī)格：1mL
本產(chǎn)品為單細胞DNA提取專用裂解液，本裂解液經(jīng)多次優(yōu)化，含有多種去污劑、變性劑和鹽，可有效抑制核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞，維持核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。純化所得DNA可用于全基因組擴增(WGA)等實驗。本產(chǎn)品足夠使用200次以上。

儲存條件：低溫運輸，4℃保存，有效期兩年。

名稱：Oligo快速復性液
貨號：BTN130204
規(guī)格：1mL
本產(chǎn)品是精心優(yōu)化的、專門用于Oligo快速復性的試劑，廣泛用于以單鏈Oligo為材料制備Adaptor、linker和其他雙鏈Oligo分子，跟各種后續(xù)的分子生物學實驗兼容，包括文庫構(gòu)建、抑制性差減雜交、AFLP等。本產(chǎn)品即可用于DNA-DNA Oligo復性，也適用于RNA-RNA Oligo和DNA-RNAOligo復性。還適用于帶修飾堿基的Oligo的復性。

儲存條件：低溫運輸、-20℃避光保存、有效期一年。

名稱：大腸桿菌DB3.1化學感受態(tài)細胞
貨號：BTN140218
規(guī)格：10*100μl
本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DB3.1細胞含有g(shù)yrA462基因，對λ噬菌體的ccdB基因產(chǎn)物的毒性具有抵抗作用，特別適合用于轉(zhuǎn)化和擴增包含ccdB基因的質(zhì)粒載體。

產(chǎn)品特點：
1. 使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達107，-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
2. DB3.1感受態(tài)細胞具有鏈霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型：F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便，質(zhì)優(yōu)價廉。

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。
自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等

使用方法：
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用。
以下實驗以100μL感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含有相應抗生素的LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意事項：
1、涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預計的克隆數(shù)較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

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